小苗株形紧凑

  第 3l 卷第 11期2012 年 11 月 种子( Seed) Vo1. 31 No. 11 No v. 2012 匐生蝇子草组培快速繁育技术研究 王越铭 , 古丽森 , 李凤琴 乌鲁木齐 830000 ; 2. 新疆林业学校 , ( 1. 新疆林业科学院, 乌鲁木齐 830000) Study on the T echniques of Tissue Culture and R apid P ropagation of S ilene rep ens P atr . W A N G Y ue-r u ing ,G U L i sen ,L I F eng -q in 摘要: 对新疆野生花卉 匐生蝇子草进行 了组织培养研究, 结果 表明: 茎段为匐生蝇子草组培最适合外植体, 初代培养最适宜 芽诱导的培养基为 MS+ 6一 BA 2. 5 mg/ L + NAA 0. 2 m g/ L , 诱导 率最高可达 85%; 丛生芽继代增殖最适宜的培养基 为 Ms + 6一 BA 1. 5 ms/ L 4-NAA 0. 01 mg/ L ; 最适宜的壮苗培养基为Ms + 6-BA 0. 5 + NAA 0. 02 me ,/ L ; 最适宜的生根培养基为 1/ 2 MS + NAA 0. 3 m g/ L , 生根率为97%。建立了高效、 稳定的匐生蝇子 草再生体系, 为匐生蝇子草的人工驯化和产业化奠定基础。 关键词: 匐生蝇子草;外植体; 组织培养 中图分类号 : S 682. 1 9 文献标 志码 : B 文章编号 : 1001 4705(2012)11-0124-03 石竹科( Caryophyllaceae) 蝇子草属 ( Silene L. ) 植 物约 400 种, 主要分布在北温带 , 其次为非州和南美 洲。中国有 112 种 2 亚种 17 变种 , 广布于长江流域和 北部各省区, 以西北和西南地区较多 J。匐生蝇子草 ( Silene Fe pel~5 Patr. ) 是类大爪草组 Sect.Spergulifoliae ( Boiss. ) Schischk.多年生草本花卉 , 高 15 ~ 50 cm, 全 株被短柔毛 , 根状茎细长, 分叉 , 经疏丛生或单生 , 不分 枝或有时分枝J , 叶互 生 、 花 白色 、 总状圆锥花序 、 花 期长, 花形美观, 在新疆分布于乌鲁木齐、 尼勒克、 伊 宁 、 布尔津等地 , 是新疆 特有的野生花卉。匐 生蝇 子草适应性强 , 耐旱 , 耐寒 , 适合西北地区城市园林绿 化, 是极具生态价值和应用前景的植物资源。虽然可 以利用 其种 子 进行 人工 培养 箱催 芽 的方 法 进行 繁 殖l3j , 但是其种子非常小, 不易采摘。而植物组织培 养技术是在无菌条件下, 将离体的植物器官( 根、 茎、 叶、 花 、 果实 、 种子等) 、 组织 ( 形成层、 花药组织 、 胚乳 、 皮层等 ) 、 细胞 ( 体细胞和生殖细胞 ) 以及原生质体 , 培 养在人工配制的培养基上 , 给予适当的培养条件 , 使其 长成完整的植株 的一种 技术 J 。北京林业大学 的李 继爱等 研究了海蝇子草组织培养与快速繁殖技术 , 大大提高了海蝇子草的繁殖速度 , 并可在短时间内获 得大量性状一致的种苗, 具有较好的市场应用价值。 收稿 日期 : 2012 07 02 作者简介: 王越铭( 1966 一) 女, 硕士, 高级实验师, 主要从事经济林及花 卉的组织 培养方面的研究 ; E mail : wym xjefs@ 163. coin。 124 结合前人的研究经验, 对匍生蝇子草的组培快速繁育 技术进行 了研究 , 为匐生蝇子草的人工驯化和产业化 提供技术依据 。 1材料与方法 1. 1材料 试验材料采 自新疆乌鲁木齐县板房沟乡的野生匐 生蝇子草植株。 1. 2外植体处理 采集匐生蝇子草幼嫩植株 , 用保温桶保鲜带 回实 验室 , 用 自来水冲洗 1 h, 用洗衣粉水浸泡 10 min。冲 洗后置于超净工作 台上, 用 70%乙醇处理 1 2 S, 无菌 水冲洗 1 2 次 , 然后用 0. 1%升汞溶液浸泡 5 8 min, 无菌水冲洗4 ~ 5 次, 将茎段剪成 1. 5 Sill 接种到 MS 培 养基上。 1. 3培养基 选用 MS 培养基为基本培养基 , 生根培养基为 1/ 2 MS, 附加不同浓度的 6-BA 和 NAA 等植物激素进行诱 导 , 培养基 中含白沙糖 3O g/ L , 琼脂粉 4. 5 g/ L , pH = 5 . 8 , 12 1 , 20 r a in 。 1. 4培养条件 培养 温度 ( 23 2 ) ℃。光 照 14 h/ d, 光 照 强度 1 500 ~2 00 0 lx。 2结果与分析 2. 1不同部位培养材料对诱导分化效果的影响 选用匐生蝇子草 2 个部位( 表 中只有 2 种外植体 ) 外植体 , 对其进行芽诱导试验。试验效果对比见表 1。 表 1 不同培养材料对匐生蝇子草芽诱导效果的影响 丛生芽诱 导培养基为 MS 培养基 , 附加相 同激素 浓度的 6-BA 和 NAA , 采用的外植体部位不同, 其分化 应用技术 王越铭 等 : 匐生蝇子草组培快速繁育技术研究 效果不同。顶芽培养 5 d 后萌发 , 20 d 左右长成 4 ~ 5 cm且有几片小叶的无菌苗 ; 茎段 培养 5 d 左右腋芽萌 发 , 20 d 左右长成 1~2 cm 同时基部产生 2 3 个较健 壮的小芽。培养 在 MS + 6-BA 2. 5 mg / L + NAA 0. 2 mg/ L 培养基上 的不 同部位外植 体 , 诱 导结果差异 很 大 。茎段分化能力强 , 其次是顶芽 , 由此得出结论 : 不 同的器官其细胞分化与再分化能力有很大差异 。 2. 2不同外植体对匐生蝇子草初代培养的影响 以匐生蝇子草的茎尖 、 茎段 2 种材料为外植体 , 接 种在 6一 BA 2. 5 mg / L + NAA 0. 2 mg/ L 培养基 , 对匐生 蝇子草进行培养材料筛选。试验结果见表 2。 表 2不同外植体对匐生蝇子草初代培养影响 从表 2 可 以看 出, 匐生蝇子草的培养材料以茎段 的诱导率最高 , 可达 85% , 由此推断: 茎段是匍生蝇子 草最适宜 的初代培养外植体材料 。 2. 3不 同浓度 6一 BA 和 NAA 对匐生蝇子草丛生苗的 影 响 将初代培养 的苗割下来转接到继代增殖培养基 中, 并对其 附加不 同浓度 的 6-BA 和 NA A, 观察其丛生 芽的形态。试验结果见表 3, 其继代培养苗如图 1所示。 表 3不同浓度 6-BA 和 NAA 配比对匍生蝇子草 继代增 殖的影响 水 L 平 增 殖 结 果 丛 生 芽 形 态 A 警 A 2 - B A 1..。5 每瓶4 - A 3 j A 盎 每 殖 A 5 -AA 0BA 0..022 每 嘎 殖 叶片较小 、 叶未展开 、 叶柄短 , 节间距离很小 , 幼苗密集、 苗短粗, 几乎没有长高, n 一12 月份茎 芽基部有玻璃化现象 。 叶片小, 叶伸展开, 叶柄较短, 茎芽丛生化 , 每丛有 2 3 个高苗 , 每丛基部有很多发育的小芽, 小苗株形紧凑。 叶片大 , 叶展开 , 叶柄伸长 , 节间距适 中, 叶腋处 可见发育的小 芽 丛生芽高度基本一致 , 茎芽健壮 。 叶片大 , 叶展开 , 叶柄伸长 , 节间距适中 , 叶腋处 发育的小芽较小 , 茎芽高度基本一致 每丛高度基本一致, 每丛茎芽为 l0个。 叶片伸展, 叶柄伸长, 节间距适中, 叶腋处无 发育 的小 芽 , 丛生芽有 l 0 ~l 2 个 高度一致 , 茎干粗壮 。 从表 3 可以看出: 匐生蝇子草的增殖培养 , 选择适 当的激素浓度是提高增殖速率的关键 。选用 6一 BA 1. 5 mg/ L , NAA 0. 01 mg/ L , 茎芽丛生化 , 叶伸展 开, 叶柄较 短 , 增殖倍数为 5 倍 , 每丛基部有很多发育 的小芽, 小 芽紧凑 。 当 6一 BA 升高至 2. 0 mg/ L , 幼苗顶芽生长受 到抑 制 , 叶未展开 、 叶柄短 , 节间距很小, 幼苗密集 , 芽粗短 , 玻璃花严重。当 6-BA 浓度降至 0. 5 mg/ L 、 NAA 0. 02 m g/ L 时, 繁殖倍数为2 倍。 图 1 匍 生蝇子草继代培养 苗 2. 4不 同浓 度 6-BA 和 NAA 对匐 生蝇 子草壮 苗的 影响 通过继代培养可以得 到大量丛 生状小芽 , 芽 的高 度为 0. 1 ~1. 5 cm, 不能转到生根培养基 , 必须有一个 壮苗培养的过程 , 将丛生芽培养成壮芽。将丛生芽接种 至壮苗培养基上 , 试验结果见表 4, 其壮苗如图2 所示。 表 g不同浓度 6-BA 和 NAA 对匐生蝇子草壮苗的影响 从表 4 结果 可知 , 6. BA 的浓度从 1. 5 mg/ L 降到 0. 5 mg/ L , NAA 从 0. 01 升到 0. 02 mg/ L 后 , 即以低浓 度 6一 BA ( 0. 5 mg/ L ) 配 以高浓度 的 NAA ( 0. 02 mg / L ) 的培养基配方适宜于匍生蝇子草的壮芽, 其丛生芽可以 长至具有一定高度能用于生根、 高度整齐一致的小芽。 2. 5不 同浓度 NAA 对试管苗生根的影响 通过壮芽培养以后 , 得到高度整齐一致的壮芽, 剪 取 2 ~ 5 cm 的壮芽将其接种到生根培养基上。匐生蝇 子草生根培养基为 1/ 2 MS, 蔗糖 1. 5%, 附加不同浓度 的 NAA 和 IBA , 试验结果见表 5 , 其生根移栽苗如图 3 所示 。 12 5

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